在不断发展的分子诊断领域中，精度和灵敏度至关重要。该领域中最革命性的创新之一是 数字PCR系统 。与传统的PCR方法不同，Digital PCR提供了提高的精度，尤其是在检测低丰度目标时。本文探讨了数字PCR系统是什么，它的工作原理以及为什么它成为研究和诊断中的首选方法。
A 数字PCR系统 （DPCR）是一种高度敏感的分子生物学技术，用于量化DNA或RNA。与依赖标准曲线和相对定量的常规定量PCR（QPCR）不同，数字PCR使用绝对定量。这是通过将DNA样本分为成千上万（甚至数百万）的个人反应来实现的。有些分区包含目标分子，而另一些则不包含目标分子。放大后，这些反应根据荧光释放为正或阴性，并且使用泊松统计计算靶分子的浓度。
数字PCR的核心是分区。分区的最流行方法是基于液滴的方法，其中样品被分为数千个纳米尺液液滴。其他方法包括基于芯片的和微流体方法。 多 RAIRE全球 的 合一数字PCR系统 通过集成的样品制备，放大和检测功能为这项技术举例说明了这项技术，从而使整个过程简化且用户友好。
现代数字PCR系统的关键特征包括：
高通量分区
最小样品量要求
无参考标准的绝对量化
增强灵敏度和精度
这些属性使数字PCR非常适合检测罕见的突变，拷贝数变化和低级病原体，这些病原体很难使用常规技术识别。
数字PCR工作流可以分为几个核心步骤：
1。分配
DNA或RNA样品的样品与PCR试剂和荧光探针混合。然后将该混合物分配为数千种单独的反应。多 合一数字PCR系统 使用集成的液滴发生器或微流体芯片有效地完成此操作。
2。热循环（扩增）
每个分区都会进行PCR扩增。如果一个分区包含靶DNA分子，则在扩增后会荧光。如果没有，它仍然是非荧光的。由于每个反应都是独立的，因此该过程避免了引物竞争和反应效率变化的问题。
3。扩增后的检测和定量
，系统读取每个分区以检测荧光的存在或不存在。然后， { [T7]} 使用Poisson统计数据计算目标分子的绝对数量，该统计量调整了单个分区中多个分子的概率。
4。使用集成软件的数据分析
，用户可以可视化结果，导出数据并进行深入的统计分析。即使对于拥有最小分子生物学训练的用户，的界面 多合一数字PCR系统 也提供了无缝的体验。
实验室从QPCR过渡到数字PCR系统有几个原因：
- 绝对量化：与QPCR不同，数字PCR无需标准曲线提供直接量化，从而使其更可靠。
- 高灵敏度：该方法在检测诸如罕见突变之类的低丰度靶标方面特别有用，稀有突变在肿瘤学，传染病和基因检测中至关重要。
- 对抑制剂的耐药性：数字PCR可以比qPCR更好地耐受PCR抑制剂，从而适用于复杂的生物样品，例如血液和组织。
- 可重复性：在实验，用户和实验室之间，数字PCR的结果高度可重现。
- 广泛的应用：
检测稀有等位基因或突变（例如，在癌症诊断中）
量化病毒载荷（例如HIV，Covid-19）
基因表达分析
拷贝数变化检测
环境DNA监测
Rainsure Global 的 多 合一数字PCR系统 是一个全面的解决方案，它集成了数字PCR工作流的所有步骤 - 样本分配，热循环和数据分析 - 一个紧凑的平台。这不仅减少了动手时间，而且还可以最大程度地减少污染风险并提高可重复性。
关键亮点包括：
全自动工作流程
高分区分辨率和吞吐量
直观的软件接口
紧凑，节省空间的设计
对于寻找可靠有效的 数字PCR系统的研究实验室和临床环境，戒酒的解决方案可在有竞争力的价格点提供最先进的技术。
{ [T7]} 正在以其无与伦比的精度，灵敏度和提供绝对定量的能力来转换分子诊断。无论您是研究罕见的基因突变还是临床医生监测最小残留疾病的研究人员，数字PCR都比传统的PCR技术具有显着优势。
借助Rachure Global的之类的产品 多合一数字PCR系统 ，采用这种先进技术从未更容易访问。随着对精确诊断的需求不断上升，Digital PCR有望成为研究和临床实验室的中流阶段。
