数字PCR系统与传统PCR技术有何不同？

在分子生物学和临床诊断中， 数字PCR系统 已成为一种变革性工具，可以重新定义我们检测和量化核酸的方式。传统的PCR技术（如常规PCR和定量PCR（QPCR））已成为分子诊断的骨干，数十年。但是，它们在灵敏度，定量准确性和可重复性方面存在局限性。相比之下，数字PCR提供了精确的，绝对的量化和提高的可靠性，使其成为特定应用程序的优越选择。本文将数字PCR与传统的PCR技术进行了比较，以更好地了解它们在现代分子诊断中的优势，局限性和不断发展的作用。

了解传统的PCR技术

常规PCR 是一种通过重复热循环扩增DNA序列的方法。该过程涉及使用TAQ聚合酶变性，退火引物和DNA链的扩展。放大后，在凝胶上可视化产品，从而提供定性结果。

定量PCR（QPCR）或实时PCR添加了基于荧光的检测系统，可实时监测DNA扩增。尽管QPCR可以估计样品中的DNA量，但它依赖于参考标准，并且对效率，试剂和样品纯度的变化敏感。定量是相对的，不是绝对的。

传统PCR方法的局限性包括：

• 对标准曲线进行定量的依赖性

• 检测低拷贝目标的灵敏度降低

• 对复杂生物样品中存在的抑制剂的耐受性有限

• 手动处理过程中的交叉污染和人为错误的潜力

这些限制促使人们需要 数字PCR系统之类的更高级技术.

是什么设置了数字PCR系统分开？

{ [T7]} （DPCR）是PCR方法的进步，该方法将DNA样品分为数千甚至数百万个微反应之前。每个分区理想地包含目标DNA序列的零或一个副本。热循环后，评估每个分区的荧光，并使用泊松统计分析实现绝对定量。

数字PCR的主要区别者包括：

1。绝对定量
与基于参考曲线提供相对定量的QPCR不同，数字PCR提供了绝对量化。这使其非常适合精确度至关重要的应用，例如稀有突变检测和基因拷贝数分析。

2。高灵敏度和精度
，因为每个分区都是独立的PCR反应，因此 数字PCR系统 可以检测单个DNA分子。这可以识别传统方法可能会错过的低丰度目标。

3。对抑制剂
数字PCR的抗性增加可耐受复杂样品（例如，血液，土壤或食物矩阵）中常见的抑制剂，从而减少了假阴性或定量错误的机会。

4。
通过其分隔的方法提高了可重复性，并降低了对反应效率的依赖，数字PCR在不同的实验室和用户之间产生了更一致的结果。

5。集成技术，
最新的平台，例如雷恩斯的 生物芯片扫描仪，旨在与 数字PCR系统 s无缝合作，可实现高通量检测，实时成像和数据导出，以进行深入分析。

比较表：数字PCR与传统PCR

数字PCR系统的应用在现代研究中

数字PCR的卓越准确性和可靠性使其在各个领域必不可少：

- 肿瘤学：检测罕见的体细胞突变，液体活检监测和最小残留疾病跟踪。

- 传染病：量化病毒或细菌负荷，尤其是在早期感染或低病毒滴度情景中。

- 遗传研究：鉴定基因拷贝数变化，SNP检测和CRISPR验证。

- 环境和食物测试：痕量中的转基因生物含量，水传播病原体或食源性细菌的检测。

为什么Rainure的生物芯片扫描仪很重要

要充分利用的功能 数字PCR系统，准确检测硬件至关重要。 RANEURE的是 生物芯片扫描仪 针对数字PCR工作流程中使用的生物芯片的高分辨率，高通量扫描设计的。它确保：

• 精确的荧光检测 数字定量

• 与各种芯片格式的 广泛兼容性

• 用户友好的软件 用于数据可视化和分析

• 快速吞吐量，适合研究和临床实验室

通过将洗礼的 数字PCR系统 与 生物芯片扫描仪相结合，研究人员可以简化其工作流程，降低错误率并在其结果中达到高度的精度。

结论

{ [T7]} 代表了分子诊断中的一个重大飞跃。它消除了与传统PCR技术相关的不确定性，为研究人员提供了一种绝对量化的可靠，敏感和可重复的方法。随着科学询问变得越来越复杂并需要更高的准确性，数字PCR是研究和临床环境的必要升级。

诸如Rainsure的生物芯片扫描仪之类的平台通过增强检测精度来补充数字PCR工作流程，从而确保每个目标分子被解释。无论您是研究癌症生物标志物还是环境DNA，升级到 数字PCR系统 都可以显着提高结果的质量。