1. DNA样本:
OD260/280=1.6-1.8
浓度≥10ng/μL
容量≥10μL
冷链运输(干冰或冰袋)
2. RNA样品:
OD260/280=1.6-1.8
浓度≥20ng/μL
容量≥20μL
冷链运输(干冰或冰袋)
3. ddPCR引物:
浓度 450nM - 900nM
4. ddPCR探针:
浓度 250nM
1.以管理员模式运行安装文件
2.设置英语为默认语言
极低的样品浓度。对于边缘阳性,需要结合阴性/阳性质控材料进行深入分析。
目标菌株可能已发生突变,核酸提取效率低。
若使用第三方试剂,需要使用锐讯 dPCR系统进行优化和验证。一些参数包括引物和探针浓度、与锐讯液滴生成油的酶相容性以及热循环曲线。
这在很大程度上与实验(处理)错误有关。在添加预混液时,建议将移液器垂直放置,尖端贴在样品孔底部,以避免在样品孔中产生气泡。如果样品孔中出现气泡,则在生成液滴时会产生较大的气泡,导致液滴数量减少。此外,请记住先加入油相包裹试剂,然后加入预混液,以确保液滴成功生成。再者,在收到货物时检查货物以及监控储存温度,以排除由于物流和储存而导致的质量受损,这一点很重要。
1. 加入油相包裹试剂后停留时间过长(>10分钟)
2. 在样品添加过程中引入气泡
3. 移液的准确性
4. 预混液在油相包裹试剂之前添加